Одри Тоту изначально хотела стать биологом, но после советов родителей поступила на курсы театрального мастерства и изменила своё мнение. В 1998 году она выиграла конкурс молодых дарований и получила первую значимую роль в фильме «Салон красоты „Венера“». Критики положительно оценили её актёрскую игру, а затем внимание привлекли её фотосессии.
Настоящая слава к Одри Тоту пришла в 2001 году после выхода фильма «Амели», который сделал её известной во всём мире. С тех пор она продолжает оставаться одной из заметных фигур французского кинематографа.